Koja je svrha primarnog antitijela u Western blotu?
Koja je svrha primarnog antitijela u Western blotu?

Video: Koja je svrha primarnog antitijela u Western blotu?

Video: Koja je svrha primarnog antitijela u Western blotu?
Video: Фильм Вестерн / Western - Прерия 2024, Jun
Anonim

S metodom izravne detekcije, konjugiran s enzimom ili fluoroforom primarno antitelo koristi se za otkrivanje antigena od interesa na mrlja . U indirektnoj metodi otkrivanja, bez oznake primarno antitelo prvo se koristi za vezanje na antigen.

Nadalje, šta je primarno antitijelo u Western blotu?

The primarno antitelo prepoznaje i veže epitop ili specifičnu aminokiselinsku sekvencu proteina od interesa. Sekundarno antitela koristi za western blotting obično su konjugirani s enzimom; najčešće korišteni enzimi su peroksidaza rotkve (HRP) i alkalna fosfataza (AP).

Osim toga, šta primarno antitijelo radi? Primarna antitijela su imunoglobulini koji se vežu za određeni antigen ( protein , peptid, male molekule itd.) od interesa i obično nisu konjugirani. Dobro primarno antitijelo prepoznaje i veže se sa visokim afinitetom i specifičnošću za pročišćavanje, otkrivanje i mjerenje antigena.

Shodno tome, koja je svrha Western blota?

A western blot je laboratorijska metoda koja se koristi za otkrivanje specifičnih molekula proteina iz mješavine proteina. Zatim se molekule proteina odvajaju prema veličini metodom koja se naziva gel elektroforeza. Nakon razdvajanja, proteini se prenose iz gela na a blotting membranu.

Kako se antitijela koriste u Western blotingu?

Antitela su polovno za otkrivanje ciljnih proteina na western blot (imunoblot). The antitela su konjugirani s fluorescentnim ili radioaktivnim oznakama ili enzimima koji daju naknadnu reakciju s primijenjenim reagensom, što dovodi do bojenja ili emitiranja svjetla, omogućavajući detekciju.

Preporučuje se: